小分子藥物
由于具有高質(zhì)量動力學(xué)的純動力學(xué)特性，SPR是一種直接測量小分子的強(qiáng)大而靈敏的工具。
SPR用于小分子相互作用
SPR作為一種敏感的平臺，可以決定藥物-靶向相互作用，對于小分子同樣適用。可以顯示實時的無標(biāo)記親和性和動態(tài)的相互作用檢測。針對不同的分析物(核苷酸、肽、藥物分子、抗體、病毒等)優(yōu)化不同的配體(蛋白質(zhì)、核苷酸、肽、受體、膜受體、抗體等)。其相互作用的測量可以在不同的液體中進(jìn)行，包括復(fù)雜的液體，如血清，唾液或有機(jī)溶劑。
選擇SPR來測量小分子的5個理由:
1. 直接測量小分子
2. 通過動力學(xué)可以得到高質(zhì)量的數(shù)據(jù)
3. 低成本
4. 很容易從靶向研究向內(nèi)部化研究轉(zhuǎn)變
5. 應(yīng)對生物制藥發(fā)展和制造業(yè)的新挑戰(zhàn)
關(guān)于SPR可以回答的關(guān)于小分子的4個關(guān)鍵問題：
1. 小分子藥物與蛋白質(zhì)的親和力是多少?
2. 分子X與分子Y相互結(jié)合和解離的速度有多快？
3. 哪種藥物分子是最好的結(jié)合受體？
4. 藥物從材料中的釋放的速率是多少？
DNA定量檢測應(yīng)用
DNA檢測可以用于檢測遺傳物質(zhì)，以檢測基因突變、突變、基因轉(zhuǎn)染或來自大量樣本的物種。通過對超過20個核苷酸的特定單鏈寡核苷酸進(jìn)行分析，可以從大量遺傳物質(zhì)中檢測和量化獨(dú)特的基因序列。27個單位的寡核是自吸附在一個標(biāo)準(zhǔn)的黃金感應(yīng)表面上的。使用一種(2-羥基乙基)-脂酰胺分子，在表面上吸附了非特異性結(jié)合。對具有互補(bǔ)序列的單鏈dNA樣品進(jìn)行了檢測，并對相同的透鏡和牛血清白蛋白(BSA)的非互補(bǔ)dNA進(jìn)行測試。Sensby SPR在廣泛的濃度范圍(0.1nM至10μM)中表現(xiàn)良好非互補(bǔ)dNA和1000nM的BSA無信號響應(yīng)。
藥物與細(xì)胞的相互作用應(yīng)用
體外細(xì)胞檢測在藥物研發(fā)過程中被廣泛使用。通常來說，這些需要標(biāo)記的材料，是基于紫外線、熒光或質(zhì)譜分析的后發(fā)現(xiàn)。多參數(shù)的SPR能夠?qū)崟r測量在未標(biāo)記的情況下的交互，在一個恒定的和控制的流動條件下。SPR測量寬角度范圍和整個SPR曲線，可以觀察幾個參數(shù)。madin-darby犬腎臟(MDCKII)細(xì)胞單層細(xì)胞沉積在黃金傳感器幻燈片上。成功地測定了小分子體重藥物普萘洛爾醇和d-mannitol與細(xì)胞單層細(xì)胞的相互作用。在刺激后，部分普萘洛爾仍留在細(xì)胞層，而d-甘尼醇被移除。通過對SPR的測量，甚至可以區(qū)分準(zhǔn)細(xì)胞和細(xì)胞外藥物吸收路徑。
用SPR測量小分子量藥物蛋白相互作用
SPR可以測量一種小分子量藥物與人類血清白蛋白(HSA)的相互作用。HSA被連接到一個帶有胺耦合化學(xué)的傳感器表面。通過SPR，確定了力壓的親和力(KD)和動力學(xué)常數(shù)(ka和KD)。利用動力學(xué)，將體積效應(yīng)與結(jié)合動力學(xué)分離開來，確保了優(yōu)質(zhì)的動力學(xué)數(shù)據(jù)。
